SCI Библиотека

Введение. Наследственные нарушения обмена пуринов и пиримидинов представляют собой гетерогенную группу заболеваний, активно изучаемых в последнее время. Поэтому разработка новых алгоритмов биохимической и молекулярно-генетической диагностики данной патологии представляется чрезвычайно актуальной.

Цель. Определить значимость использования технологий хроматографии-массспектрометрии и молекулярно-генетического анализа в диагностике наследственных нарушений обмена пуринов и пиримидинов у детей.

Материалы и методы. C использованием хромато-масс-спектрометрического и молекулярно-генетического анализа исследован уровень ключевых метаболитов обмена нуклеотидов в моче у 137 детей. Среди них 72 пациента с подозрением на наследственные нарушения обмена пуринов и пиримидинов (по результатам выполнения традиционного клинико-лабораторного исследования), 35 детей с подозрением на нарушение обмена аминокислот и органических кислот, составивших группу сравнения, а также 30 детей контрольной группы.

Результаты. Среди 72 детей с подозрением на нарушение обмена пуринов и пиримидинов выявлено 18 пациентов с различными формами наследственно обусловленной патологии. Биологический материал 3 пациентов с установленным синдромом Леша – Нихана был подвергнут таргетному секвенированию гена HPRT1 методом NGS. При этом обнаружены мутации p. G16V (c.47G>T), p. R48H (c.143G>A) и p. L49R (c.146T>G).

Заключение. Результаты выполненной работы обосновывают высокую диагностическую значимость сочетанного использования методов аналитической химии (состоящих в использовании технологии хромато-масс-спектрометрического анализа) и молекулярно-генетического исследования для установления наследственно обусловленных нарушений обмена пуринов и пиримидинов. Показано, что определение в моче содержания пуринов и пиримидинов может рассматриваться как перспективный методологический аспект клинико-лабораторной диагностики отдельных наследственно обусловленных нарушений обмена. В качестве подтверждения диагноза рекомендовано использовать молекулярно-генетический анализ генов, включающий технологию таргетного NGS-секвенирования.

Введение. Цитогенетический метод исследования является одним из ключевых в диагностике острых лимфобластных лейкозов. Помимо специфических транслокаций, включенных в классификацию ВОЗ, анализ кариотипа позволяет выявить дополнительные хромосомные аберрации и их сочетания. Установление особенностей природы цитогенетических изменений в лейкемических клетках составляет фундаментальную основу поиска клинико-лабораторных маркеров риск-стратификации пациентов детского и более старшего возраста с первичным острым лимфобластным лейкозом из В-клеток-предшественников.

Цель. Определить особенности спектра и частоту встречаемости цитогенетических изменений в лейкемических клетках пациентов детского, подросткового и молодого взрослого возраста с острым лимфобластным лейкозом из В-клетокпредшественников. Материалы и методы. Проанализированы образцы лейкемических клеток 1002 пациентов с первичным острым лимфобластным лейкозом из В-клетокпредшественников. В исследование вошли пациенты от 0 до 29 лет (медиана – 4,68), соотношение по полу составило мальчик: девочка 1,15:1. Анализ хромосомных перестроек проводился методами стандартного цитогенетического исследования и флуоресцентной in situ гибридизации. Определение специфических химерных генов осуществлялось методом ПЦР.

Результаты. Проанализирована структура кариотипа всех первичных острых лимфобластных лейкозов из В-клеток-предшественников (модальное число, дополнительные хромосомные аберрации, дисбаланс) среди подгрупп пациентов со специфическими хромосомными перестройками (t(1;19), t(12;21), t(9;22) и t(11; v)/ KMT2A(+)) и группы B-other.

Заключение. Выявлены паттерны характерных для разных подгрупп дополнительных хромосомных аберраций. Установлено, что частота встречаемости псевдодиплоидного кариотипа выше, а кариотипа с высокой гипердиплоидией – ниже во всех подгруппах со специфическими транслокациями в сравнении с группой B-other. Наивысший уровень нестабильности кариотипа выявлен в подгруппе с t(12;21), а самый низкий – при KMT2A(+). Показано, что имеются различия в структуре цитогенетических изменений в разновозрастных группах: так, неблагоприятные кариотипы KMT2A(+), t(9;22) с низкой гипердиплоидией встречаются чаще у молодых взрослых, чем у детей и подростков, а частота встречаемости благоприятных кариотипов с t(12;21) и высокой гипердиплоидией – ниже.

Введение. К предикторам тромботических осложнений хронических миелопролиферативных новообразований (ХМПН), нередко приводящих к летальным исходам, могут относиться как клинические особенности течения основного заболевания, так и факторы, связанные с патогенезом приобретенной или наследственной формы тромбофилии.

Цель. Выявить частоту встречаемости мутаций генов гемостаза у пациентов с ХМПН, имеющих тромботические осложнения.

Материалы и методы. Научное исследование проведено на базе Республиканского специализированного научно-практического медицинского центра (РСНПМЦ) гематологии в ходе обследования 183 пациентов, 142 из которых состояли на учете с диагнозом «Хронические миелопролиферативные новообразования», с учетом наличия (n=50) либо отсутствия (n=92) эпизодов тромбоза. Были проведены исследования мутаций генов факторов свертывания крови: G(455)A гена FGB, G20210A гена F2, G10976A (Arg353Gln) гена F7, G1691A (Arg506Gln) гена F5 – в когорте пациентов с ХМПН.

Результаты. Вариантный ген F7 (G10976A) встречался в 3 раза чаще (OR=3,25), а FGB (G(455)A) – в 8 раз чаще (OR=8,19) в группе пациентов с ХМПН, чем у практически здоровых людей контрольной группы. Однако статистический анализ показал достоверные различия частоты встречаемости вариантных отклонений лишь в отношении мутационного гена FGB (p<0,001).

Введение. Развитие инфекции в ожоговых ранах во многом определяется бактериями, устойчивыми к антибактериальным препаратам. К таковым, в частности, относятся Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Klebsiella pneumoniae и Pseudomonas aeruginosa.

Цель. Поиск альтернативных методов лечения, основанных на использовании антибактериальных и антиоксидантных свойств флавоноидов растительного происхождения.

Материалы и методы. Приготовление in vitro метанольного экстракта R. damascena методом мацерации в концентрациях от 70 мг/мл (г/л) до 300 мг/мл (г/л). Использование технологии высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для идентификации флавоноидов лепестков Rosa damascena. Получение культур микроорганизмов Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Klebsiella pneumoniae и Pseudomonas aeruginosa. Оценка проявления экстрактом лепестков Rosa damascena антибактериальных и антиоксидантных свойств.

Результаты. Показано, что экстракт из лепестков розы проявлял высокую антибактериальную активность в отношении грамположительных микроорганизмов, причем наибольший эффект наблюдался в отношении S. aureus (26,6 мм). Экстракт исследовали в различных концентрациях: 200, 100, 50, 25 и 12,5 мг/мл (г/л). Был осуществлен качественный анализ его химического состава методом ВЭЖХ, который показал высокое содержание в экстракте флаванолов и фенольных кислот. Оценка антиоксидантной активности проводилась с помощью тестов на «вымывание» свободных радикалов, в частности, по методу DPPH. Полученные данные свидетельствуют о том, что лепестки R. damascena могут использоваться в медицинской практике в качестве источника биологически активных соединений, проявляющих как антибактериальные, так и антиоксидантные свойства. Сочетанное их проявление является фактором, существенно повышающим эффективность медицинского применения экстракта растительного происхождения.

Заключение. Экстракты лепестков Rosa damascena содержат значительное количество фитохимических биологически активных соединений, обладающих антибактериальными и антиоксидантными свойствами, что делает их сопоставимыми с синтетическими антибактериальными препаратами и аскорбиновой кислотой (как антиоксидантом).

Введение. Около 150 миллионов человек ежегодно страдают от инфекций мочевыводящих путей (ИМП), основной причиной которых является уропатогенная Escherichia coli. По распространенности ИМП уступают только инфекциям дыхательных путей. Для E. coli характерна множественная лекарственная устойчивость (МЛУ), что объясняется наличием у них генов эффлюксных насосов.

Цель. Проведение оценки частоты встречаемости генов эффлюксных насосов acrA, acrB и tolC в штаммах кишечной палочки (UPEC), выделенных от пациентов с сахарным диабетом, проходивших лечение в учебном госпитале Аль-Хусейн.

Материалы и методы. Из 100 образцов мочи, взятых у пациентов с сахарным диабетом, было выделено 20 штаммов E. coli. Все они были диагностированы с использованием методов биохимического и молекулярно-биологического анализа на основе полимеразной цепной реакции (ПЦР). В соответствии с рекомендациями Института клинических лабораторных стандартов (CLSI) для определения чувствительности к противомикробным препаратам использовали метод дисковой диффузии.

Результаты. Среди всех выделенных изолятов 18 (90%) проявили высокую устойчивость к амикацину, 17 (85%) – к цефтриаксону, 17 (85%) – к пиперациллину, 15 (75%) – к ципрофлоксацину, 13 (65%) – к триметоприму и 9 (45%) – к азтреонаму; чувствительность к меропенему была самой высокой у 4 изолятов (20%). 18 (90%) изолятов обладали МЛУ. Частота встречаемости гена acrA составила 100% (20 изолятов), гена acrB – 95% (19 изолятов), гена tolC – 85% (17 изолятов).

Заключение. Меропенем и азтронам являются наиболее эффективными антибактериальными препаратами для лечения инфекций, вызванных E. coli, у пациентов с сахарным диабетом с генами эффлюксных насосов. Результаты проведенного исследования подтверждают концепцию о том, что гены эффлюксных насосов acrA, acrB и tolC играют существенную роль в устойчивости уропатогенной кишечной палочки к различным антибактериальным препаратам, что обусловливает необходимость применения новых методов лечения пациентов с сахарным диабетом и инфекциями мочевыводящих путей.

Введение. Грамотрицательный условно-патогенный микроорганизм Pseudomonas aeruginosa является возбудителем нозокомиальных инфекций, в том числе в местах ожогов и хирургических вмешательств. Ожоги и раны нарушают естественную защиту кожи, что способствует более активной колонизации P. aeruginosa и вызывает инфекцию вследствие сочетанного воздействия матричных белков и возбудителей воспалительных процессов.

Цель. Провести отбор и генетический анализ изолятов P. aeruginosa, полученных из различных образцов кожи (с ожогами и ранами) пациентов с ослабленным иммунитетом, пребывавших в реанимационных отделениях больниц мухафазы Насирия.

Материалы и методы. Для исследования было отобрано 113 образцов тканей пациентов с ожогами и хирургическими ранами. С использованием стандартных методов биохимического и молекулярно-биологического определения факторов вирулентности установлено, что 26 изолятов являются положительными на P. aeruginosa. Одновременно проводили мониторинг генов вирулентности (OprL, ToxA и LasR) и генов резистентности к противомикробным препаратам (Blavim-2, Blakpc и MexB) для идентификации отдельных штаммов бактерий.

Результаты. По результатам ПЦР-теста было установлено наличие генов OprL и ToxA (84,62% образцов), гена LasR (88,46%) и гена MexB (80,77%). Вместе с тем гены blaKPC и blaVIM2 не были обнаружены. Результаты секвенирования 16S рДНК десяти специально отобранных изолятов были отправлены в компанию Macrogen (Корея) для выявления 100%-ного сходства с другими родственными штаммами на основании данных сайта Национального центра биотехнической информации (NCBI) с помощью программы BLAST. Эти изоляты были зарегистрированы в Генном банке под идентификационными номерами LC816373, LC816374, LC816375, LC816376, LC816377, LC816378, LC816379, LC816380, LC816381 и LC816382.

Заключение. Результаты выполненного исследования показали наличие генов OprL, ToxA, LasR и MexB.

Цель. Изучить распространенность и спектр маркеров резистентности к макролидам в изолятах Mycoplasma genitalium, выделенных от пациентов из областных центров Республики Беларусь, обратившихся за медицинской помощью в лечебно-профилактические учреждения за период с марта 2022 по март 2024 года.

Материалы и методы. 322 образца ДНК Mycoplasma genitalium из трех областных центров (Брест, Витебск, Минск) Республики Беларусь исследовали на наличие маркеров резистентности к макролидам с помощью разработанной технологии полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, которая позволяет выявлять любые нуклеотидные замены в гене 23S pPHK M. genitalium в позициях 2058, 2059, 2611 (согласно нумерации E. coli). Для подтверждения характера нуклеотидных замен все образцы, несущие мутации, были дополнительно исследованы методом секвенирования по Сэнгеру.

Результаты. За период с марта 2022 по март 2024 года по Республике Беларусь частота распространения мутаций резистентности к макролидам у M. genitalium составила 15,22% (49/322). Мутационный профиль представлен 2 вариантами нуклеотидных замен V домена 23S pPHK M. genitalium: позиция A2059G – 10,25% (33/322) и A2058G – 4,97% (16/322). Распространенность макролидорезистентности и мутационный профиль у M. genitalium по областным городам Беларуси составили: Минск – 20,6% (41/199) с мутациями в позициях A2059G – 14,57% (29/199) и A2058G – 6% (12/199); Брест – 5% (5/90) с мутациями в позициях A2059G – 4% (4/90) и A2058G – 1% (1/90); Витебск – 9% (3/33) с мутациями в позициях A2058G – 6% (2/33) и A2059G – 3% (1/33). Количество выявленных мутаций в позиции A2059G преобладает над A2058G в два раза. Такое количественное соотношение между выявленными генетическими детерминантами макролидорезистентности (A2059G и A2058G) характерно как для отдельных областных центров, так и для республики в целом. Распространенность маркеров резистентности к макролидам у M. genitalium в различных гендерных группах составила: в женской популяции – 15,56% (35/225), в мужской популяции – 14,43% (14/97). Различий в мутационном спектре у M. genitalium, выделенной от женщин и мужчин, не выявлено. В обеих группах преобладает один и тот же вариант в позиции A2059G. Результаты депонированы и импортированы на онлайн-платформу для анализа и обмена данными антибиотикорезистентности AMRcloud (https:// amrcloud. net/ru/project/demares/).

Заключение. Полученные в рамках выполнения в России многоцентрового проекта DeMaRes (Detection of Macrolide Resistance – Mycoplasma genitalium) данные являются первыми результатами, демонстрирующими актуальность проблемы антибиотикорезистентности у M. genitalium для Республики Беларусь. Обнаруженные мутации подчеркивают необходимость внедрения методов молекулярной диагностики (ПЦР) в практику рутинного тестирования всех M. genitalium-положительных образцов на наличие мутаций устойчивости к макролидам.

Наблюдается рост заболеваемости коклюшем среди взрослого населения, особенно заметный после пандемии COVID-19, когда в начале 2024 г. зарегистрировано значительное увеличение числа случаев заболевания в США, Европе и России. В статье обсуждается эффективность вакцин против коклюша у взрослых с акцентом на особенности иммунного ответа и значимость ревакцинации. Отмечается, что бесклеточные вакцины обеспечивают высокий уровень иммунитета со значительным увеличением титров антител Immunoglobulin G и Immunoglobulin A. Ревакцинация у взрослых характеризуется существенным повышением уровней антител и обеспечением длительной защиты от коклюша, несмотря на более высокую частоту местных побочных эффектов по сравнению с цельноклеточными вакцинами. Осуществлен анализ эффективности вакцинации беременных женщин бесклеточными вакцинами в третьем триместре беременности, отмечена важность ревакцинации женщин данной группы риска. Вакцинация против коклюша у взрослых является эффективным методом предотвращения распространения заболевания, однако требуются стандартизация протоколов вакцинации и проведение дополнительных исследований для оптимизации стратегий ревакцинации.

Статья представляет собой краткий экскурс в историю становления клинической лабораторной службы в Советской Белоруссии. Раскрыты объективные предпосылки к проведению I Республиканского съезда врачей-лаборантов, представлены основные материалы сделанных его делегатами выступлений и характер принятых решений, которые явились основополагающими для последующего развития службы клинической лабораторной диагностики в стране.

Показан вклад выдающихся медиков – первых заведующих кафедрами факультетской и госпитальной терапии, педиатрии, дерматовенерологии, микробиологии, а также биохимии и общей химии медицинского факультета Белорусского государственного университета и Белорусского (Минского) медицинского института в становление специальности «клиническая лабораторная диагностика».

Приведены сведения об основных нормативных документах МЗ БССР и МЗ СССР, явившихся организационными предпосылками к проведению съезда.

В статье приводятся результаты внедрения генно-инженерных биологических препаратов (ГИБП) у пациентов со среднетяжелым и тяжелым течением псориаза, находящихся на диспансерном наблюдении МГБ № 3 г. Астаны (Казахстан). Проведен анализ терапии в условиях реальной практики, оценивались факторы неблагоприятного прогноза псориаза, главные цели терапии, критерии обоснования назначения пациентам ГИБП. В статье представлены клинические случаи из личного наблюдения пациентов, получающих ГИБП в течение от 2 месяцев и более 2 лет.